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2019-05-12 19:10

  倾向 对肌肽精制过程中的工艺前提举行实行研讨。方法 经由过程设计三要素三水平的正交实行,试探优选最好精制工艺前提。结果 确定精制工艺参数活性炭用量为肌肽粗品的3%,脱色反应时间为30 min,醇沉步骤乙醇用量为滤液量的120%。结论 该方法重现性好、收率较高,适用于原料药的实际生产。   关键词肌肽;精制;活性炭      肌肽是一种天然小肽,由β-丙氨酸和L-组氨酸构成,是存在抗氧化作用的活性物质。近年来已经由过程合成手段取得肌肽,随着研讨领域的不断深入,学者们发现肌肽经由过程抵御氧化应激、重金属螯合等机制,抑制化学性修饰和大分子聚合物的构成,从而调治全身各组织的蛋白质代谢。近年来医药领域研讨工作证明,肌肽可用于预防缺血及再灌注引起的脑组织毁伤〔1〕;医治胃溃疡、烧伤、抗肿瘤〔2〕;并存在抗衰老、免疫调治作用;对眼局部医治白内障的研讨也逐渐崭露锋芒〔3〕,并表现出对角膜组织代谢毁伤和老年性白内障的功效。   肌肽的药用作用明确,但目前在海内主用于保健、化妆品、食品添加剂等方面,将其开发成药物有着辽阔的使用前景和重的临床意义。根据国家求,肌肽作为原料药申报需做大量的实行研讨,精制工艺是关乎原料药品质的重技术内容,以将原料药中的杂质下降到合理的限制以下。本文对肌肽的精制工艺举行了优化及挑选,以期取得符合国家求的精制工艺前提。   1 资料与仪器   肌肽粗品、活性炭(四川三高生化股份有限公司);乙醇(湖南尔康制药有限公司);集热式恒温加热磁力搅拌器(巩义市予华仪器有限责任公司);高效液相色谱仪(LC-2010C,日本岛津公司);其他抽滤装置、电子天平等均为实行室常规仪器。   2 方法与结果   2.1 精制步骤将肌肽粗品溶解于蒸馏水中,加入一定量的活性炭,加热搅拌脱色,脱色后趁热过滤除去活性炭,于滤液中加入一定量的乙醇醇沉,充分析出后将醇沉物滤出、洗涤,经干燥和烘干后得精制品。   2.2 精制品中杂质含量的测定为了检测精制过程对粗品中杂质的去除效果,对制得的精制品采用高效液相色谱法测定精制品中杂质的含量[4]。色谱前提为流动相0.040mol/L磷酸氢二钾溶液(用磷酸调pH值至6.30)-乙腈(3862);色谱柱为NH2柱(200妹妹×4.6妹妹,5μm,资生堂公司);流速1.0ml/min;检测波长210nm;柱温35℃。按主成分本身对照法计算杂质含量。   2.3 正交设计实行在对肌肽粗品的精制过程中,对精制效果有重影响的要素有活性碳的用量(A)、脱色时间(B)和醇沉过程中乙醇量占滤液量的百分比(C),选择这三个要素举行正交设计,每要素3水平,分别为1%、3%、5%,15、30、45min,80%、100%、120%、遵照L9(34)正交表安排实行,以精制品总杂质含量为评价目标,挑选出最优的精制工艺。实行结果见表1。   表1 正交实行结果与分析   2.4直观分析以精制品中的杂质含量为目标举行直观分析,杂质含量越少,则精制品的品质越好。极差R反映各要素对目标的影响程度,R值越大对杂质含量的影响越大,反之则影响越小。主次要素顺序确定为A > B >C。其中A要素K1> K3> K2;B要素K1 > K3 > K2;C要素K1 > K2 > K3。确定较优精制工艺为A2B2C3。即活性炭用量为肌肽粗品的3%,脱色反应时间为30 min,醇沉步骤乙醇用量为滤液量的120%。   3 讨论   本文采用正交设计实行优化了肌肽的精制工艺,并对优选出的工艺前提举行了验证实行。结果表明优化的精制工艺能够大幅度的下降肌肽粗品中的杂质含量,为肌肽的药用奠定了优秀的基础。该方法重现性好、收率较高,易于操作把持,适用于原料药的实际生产。      参考文献   [1] 沈耀, 胡薇薇, 陈忠. 肌肽和中枢神经系统疾病. 浙大学报(医学版), 2007, 36 (2) 199- 203.   [2] Nagai Kineshirou, Use of L-carnosine for tumour treatment[P] DE 3424781, 1985, 01, 17   [3] 郭勇, 严宏, 肌肽预防白内障构成的作用[J]. 眼科学报, 2006, 22(2) 85-88.   [4] 韩木南, 陈晓辉, 其其格, 等. 高效液相色谱法测定L-肌肽原料药的含量及其有关物质[J]. 中国药学杂志, 2009, 44(14) 1111-1113.   注本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文   

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